Avaliação in vitro e in vivo do potencial imunomodulador de frações polissacarídicas extraídas do chuchu / In vitro and in vivo evaluation of the immunomodulatory potential of polysaccharide fractions extracted from chayote

Os polissacarídeos não amido constituem importante parcela das fibras dietéticas, e podem ser considerados modificadores de resposta biológica (MRBs), uma vez que são capazes de interagir com o sistema imune, e suas características estruturais estão atreladas aos efeitos biológicos gerados. O potencial imunomodulador dos polissacarídeos do chuchu já foi demonstrado, entretanto, informações sobre suas características estruturais e sua relação com o perfil imunológico são limitadas a ensaios in vitro, não havendo, até o momento, estudos in vivo. Assim, o objetivo do estudo foi avaliar, in vitro e in vivo, o perfil imunomodulador de frações isoladas do polissacarídeo do chuchu. Por meio da filtração tangencial foram obtidas as frações de estudo, SeRI<50 e SeSE<50, respectivamente as frações isoladas do polissacarídeo do chuchu extraídas do resíduo insolúvel e do sobrenadante pós-tratamento enzimático para retirada do amido com peso molecular menor que 50 kDa. A caracterização por meio da determinação da composição monossacarídica e da análise de ligação apontou que ambas as frações são formadas por galacturonanos, arabinanos, arabinogalactanos e glicomananos. A SeRI<50 é menos ramificada e, provavelmente, composta por galactanos, enquanto SeSE<50 é mais ramificada e, provavelmente, composta por galactuglucomananos. Essas frações foram capazes de estimular os macrófagos murinos RAW 264.7 e as células mononucleares do baço, do sangue e do intestino delgado de camundongos Balb/c, sugerindo um perfil de ação mais pró-inflamatório, com base nos efeitos produzidos pelas espécies reativas de oxigênio, citocinas e pelos marcadores de ativação de linfócitos. Ambas as amostras, SeRI<50 e SeSE<50, mostraram ser eficientes em ativar a cascata imunológica, não sendo citotóxicas mesmo com a maior concentração testada no ensaio in vitro

Non-starch polysaccharides are important components of dietary fibers, and they may be considered biological response modifiers (MRBs), as they may interact with the immune system, depending on their structural characteristics. The immunomodulatory potential of chayote polysaccharides has already been demonstrated, however, information on their structural characteristics and their relationship with the immunological profile are limited to in vitro assays, with no reports on in vivo studies. Thus, the objective of the study was to evaluate, in vitro and in vivo, the immunomodulatory profile of polysaccharide from chayote. Through tangential filtration two fractions, SeRI <50 and SeSE <50, were obtained, respectively the fraction isolated from the chayote polysaccharide extracted from the insoluble residue and the fraction from the enzymatic post-treatment supernatant to remove starch, both under molecular weight 50 kDa. The monosaccharide composition and linkage analysis showed that both fractions are formed by galacturonans, arabinans, arabinogalactans and glycomanans. SeRI <50 is less branched and probably composed of galactans, while SeSE <50 is more branched and probably composed of galactuglucomannans. These fractions were able to stimulate murine macrophages RAW 264.7 and mononuclear cells of the spleen, blood and small intestine of Balb / c mice, suggesting a more proinflammatory action profile, based on the reactive oxygen species production, cytokines and lymphocyte activation markers. Both samples, SeRI <50 and SeSE <50, were able to efficiently activate the immunological cascade, not being cytotoxic even at the highest concentration tested in the in vitro assay

Imunofenotipagem dos linfócitos positivos para indoleamina 2, 3 dioxigenase (IDO) em cultura de células de placenta bovina / Phenotyping of the indoleamine 2, 3 dioxygenase (IDO) positive lymphocytes in bovine placental cell culture

A gestação é um estado fisiológico que exige adaptações imunológicas para que transcorra normalmente. Nesse período a mãe e o feto apresentam uma relação imunológica, ou seja, a interface materno fetal. A enzima indoleamina 2,3 dioxigenase (IDO) desempenha um papel importante na tolerância materno fetal, por ser responsável pela metabolização do triptofano, impedindo por diversas vias a proliferação principalmente de linfócitos TCD8. Diversos tipos celulares estão presentes na interface materno fetal e vários deles podem expressar a IDO. Os leucócitos com perfil Th1 produzem uma citocina conhecida: o interferon γ que estimula a expressão da IDO em vários tipos celulares. Os linfócitos são divididos em subpopulações de acordo com sua função e fenótipo. Seus tipos incluem linfócitos T, linfócitos B e as células natural killer (NK). Hormônios também atuam nesse processo a progesterona que exerce função determinante sobre a resposta imunológica materna podendo alterar o prognóstico gestacional e o estrógeno essencial para a tolerância materno fetal e manutenção da prenhez. Dessa maneira este trabalho tem por objetivo principal identificar os linfócitos presentes na placenta bovina em cultivo que expressam IDO (linfócitos T, linfócitos B e células NK), frente a estimulação por progesterona, estrógeno e interferon γ nas diversas fases gestacionais utilizando a citometria de fluxo. Segundo os resultados no período de 67,5 a 77, 5 dias com a adição de interferon γ a expressão da enzima IDO aumentou discretamente nos linfócitos TCD3, TCD4, e diferente dos linfócitos T CD8 apresentaram uma elevada expressão da enzima (4,48 ± 2,12 - 8,65± 4,91)....

Pregnancy is a physiological state that requires immune adaptation in order to be successfully carried on. During this period, mother and fetus establish an immune tolerance status at the maternal fetal interface. Indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) plays an important role in maternal-fetal tolerance by metabolizing tryptophan, impairs by several pathways, mainly T CD8 cells proliferation. Several cell types are present in the maternal fetal interface and several of them can express IDO. Leucocytes with Th1 produce a cytokine known as interferon γ that stimulates the expression of IDO in several cell types. Lymphocytes are divided into sub-populations according to their function and phenotype: T lymphocytes, B lymphocytes and natural killer cells (NK). Hormones also involved in this process where progesterone exerts decisive role on maternal immune response that may change gestational outcome and estrogen is essential for fetal maternal tolerance and maintenance of pregnancy. Therefore, the main objective of this study was to identify lymphocytes in the bovine placental cell culture that are sensitive to progesterone, estrogen and interferon γ, IDO expression in various gestational stages using flow cytometry. According to the results in the gestational period from 67.5 to 77.5 days with the addition of interferon γ expression IDO was slightly increased in TCD3 lymphocytes, CD4, and differently from the other T cells CD8 displayed an higher expression of the enzyme (4.48±2.12 to 8.65±4.91)...

Avaliação de células T regulatórias e pefil de ativação de linfócitos T na ceratoconjuntivite seca associada ao HTLV-1 / Regulatory T cells evaluation and T lymphocyte activation profile in keratoconjunctivitis sicca associated with HTLV-1

O HTLV-1 é o agente etiológico da leucemia /linfoma de células T do adulto (ATLL), da paraparesia espástica tropical/ mielopatia associada ao HTLV-1 (HAM/TSP) e da uveíte. Além destas, a ceratoconjutivite seca (CCS), doença multifatorial da lágrima e da superfície ocular, tem sido descrita com maior frequência em indivíduos infectados pelo HTLV-1. Assim como em outras doenças associadas, a CCS tem sido relacionada a uma elevada carga proviral. As células T regulatórias (Treg) são importantes na manutenção da homeostase do sistema imunológico e um comprometimento da imunorregulação exercido por elas pode contribuir para o ambiente inflamatório observado na CCS. Este estudo objetivou avaliar os linfócitos Treg de pacientes com CCS associada à infecção pelo HTLV-1. Foram realizados ensaios de imunofenotipagem por citometria de fluxo para avaliar a frequência de linfócitos T ativados (HLA-DR+) e de células T CD4+ e CD8+ regulatórios (FOXP3+), bem como a produção de IL-10 e TGF-β por estas células. Foram avaliados 37 pacientes infectados pelo HTLV-1 e assintomáticos para HAM/TSP, sendo 27 com diagnóstico positivo para a manifestação ocular (CCS), 10 com diagnóstico negativo (ASS), além de 17 voluntários não infectados pelo vírus (NI). As frequências de linfócitos T CD4+FOXP3+, CD8+FOXP3+, CD4+HLA-DR+ e CD8+HLA-DR+ foram significativamente maiores nos grupos CCS e ASS, quando comparados aos indivíduos não infectados. Quanto à produção das citocinas imunossupressoras, foi observada uma maior frequência de linfócitos T CD4+FOXP3+ duplo produtores de IL-10 e TGF-β no grupo CCS quando comparado ao grupo ASS. Com relação aos linfócitos CD8+FOXP3+, o grupo CCS apresentou uma maior frequência de células mono produtoras de IL-10 quando comparado ao ASS. Nossos resultados sugerem que a menor frequência de células Treg CD8+ produtoras de TGF-β em indivíduos infectados pelo HTLV-1 com CCS, pode contribuir para a intensificação da ativação celular e fisiopatologia da doença.

HTLV-1 is the causative agent of leukemia/lymphoma adult T-cell (ATLL), tropical spastic paraparesis / myelopathy associated with HTLV-1 (HAM / TSP) and uveitis. In addition, keratoconjunctivitis sicca (KCS), a multifactorial disease of the tear and of the ocular surface, has been more frequently reported in patients infected with HTLV-1. As for other HTLV-1-associated diseases, KCS has been related to a high proviral load. Regulatory T (Treg) cells are important in maintaining the homeostasis of the immune system. An impairment in the immunoregulation function of Treg may contribute to the inflammatory environment observed in the KCS. This study aimed to evaluate the Treg cells of patients with KCS associated with HTLV-1. Frequency of activated T cells (HLA-DR+) and CD4+ and CD8+ Treg cells (FOXP3+), as well as IL-10 and TGF-β production by Treg were quantified using flow cytometry. Thirty-seven HTLV-1 individuals were included (27 asymptomatic for HAM/TSP with positive diagnosis of ocular manifestation (KCS), 10 with negative diagnosis (ASS - asymptomatic). Seventeen non-infected individuals were included as controls (NI). The frequencies of CD4+ FOXP3+ T cells, CD8+FOXP3+, CD4+HLA-DR+ and CD8+HLA-DR+ were significantly higher in KCS and ASS groups when compared to non-infected individuals. As the production of immunosuppressive cytokines, a higher frequency of CD4+ FOXP3+ double producers of IL-10 and TGF-β in the KCS group was observed when compared to group ASS. Regarding the CD8+FOXP3+ lymphocytes, the KCS group had a higher frequency of mono cells producing IL-10 when compared to the ASS. Our results suggest that the lower frequency of Treg cells CD8+ TGF-β-producing in individuals infected with HTLV-1 with KCS, may contribute to the intensification of cellular activation and pathophysiology of the disease.

Application of Comet assay to assess the effects of white bean meal on DNA of human lymphocytes

This study was conducted to evaluate the potential induction of genotoxic effects of white bean flour using the Comet assay. The test was conducted with human lymphocytes present in whole blood immediately after collection, by incubation with white bean flour in three concentrations (3.92, 9.52 and 18.18 mg/mL) at 37 ºC for 4 h followed by preparation of slides. Samples were considered positive (above 20% damage) when the damage observed to cellular DNA was higher than the negative control. No genotoxic potential was found at the doses tested. However, it would be premature to suggest absence of risk to human health of DNA damage since the exposure of cells to the extract was restricted to four hours rather than a whole cell cycle. Additionally, further information on toxicology should be obtained in future studies.

Este estudo foi realizado para avaliar o potencial de indução de efeitos genotóxicos da farinha de feijão branco utilizando o teste do Cometa. O ensaio foi realizado com linfócitos humanos presentes no sangue imediatamente após a coleta, por incubação com farinha de feijão branco em três concentrações (3,92, 9,52 e 18,18 mg/mL) a 37 ºC por 4 h, seguida de preparação das lâminas. As amostras foram consideradas positivas (acima de 20% de dano), quando os danos observados no DNA celular foram maiores do que o controle negativo. Verificou-se que as doses testadas não mostraram potencial genotóxico. No entanto, seria prematuro fazer recomendações sobre o padrão de riscos para a saúde humana resultantes de danos ao DNA já que exposição das células ao extrato foi restrito ao período de quatro horas e não durante um ciclo celular completo. Além disso, outras informações sobre a toxicologia devem ser obtidas no futuro.

Reference ranges for lymphocyte subsets in healthy adult male Omanis

To determine the reference ranges of lymphocyte subsets in serologically HIV-seronegative healthy male adults in Oman. A cohort, of 118 healthy male blood donors ranging in age from 18-51 years, was included in the study. The average age was 25 years. Blood samples collected into tubes containing ethylene-diamine-tetra acetic acid were investigated for lymphocyte subsets using flow cytometer. This study was conducted in the Immunology Laboratory of the Sultan Qaboos University, College of Medicine and Health Sciences, Muscat, Oman during the year 2006. For the 118 males investigated, the mean percentage and absolute values of the lymphocyte subsets were as follows: CD3: 68.53 +/- 7.5%, 1701 +/- 489 cells/microliter; CD4: 40.4 +/- 6.5%, 1006 +/- 319 cells/microliter; CD8: 25.8 +/- 5.9%, 638 +/- 225 cells/microliter; CD19: 13.7 +/- 4.7%, 349 +/- 158 cells/microliter, and CD56: 12.2 +/- 6.7%, 308 +/- 204 cells/microliter. The ratio of CD4/CD8 was 1.6. Immunophenotyping has been used to establish reference values of lymphocyte subsets in normal healthy adult males in Oman. The Omani male reference values obtained in this study show wide variations compared with kits values previously used as a reference

Biopsia de ganglio linfatico: comparación de la biopsia por aguja fina y excisional / Biopsy of lymphadenopathy patient: comparation of fine needle and excisional

Entre septiembre de 1996 y octubre de 1997, se evaluaron a 31 pacientes con síndrome adenomegálico de etiología desconocida, que acudieron o fueron referidos al Servicio de Cirugía II del Hospital Universitario de Caracas. La relación hombres/mujeres fue 2,875:1, con una media de edad de 39.8 años. A estos se les realizó biopsia por aspiración con aguja fina y biopsia excisional del mismo ganglio linfático, tomando como patrón de Oro a la última. Se obtuvieron 72,42 por ciento (24 pacientes) de citologías adecuadas con sensibilidad, especificidad, valores predictivos buenos; y además a pesar de no dar el diagnóstico específico en las patologías hematopoyéticas malignas, sirve para dirigir los estudios diagnósticos sucesivos, incluyendo la biopsia excisional

Disminución de la respuesta proliferativa de los linfocitos frente a antígenos ambientales, como indicador precoz / Precocious indicator of the lympocytary injuries induce by the immunodeficiency virus human

A fin de evaluar las células CD4+/CD29+ y sus respuestas frente a diferentes antígenos en estadíos de la infección por el Virus de Imunodeficiencia Humana (VIH), estudiamos 26 pacientes seropositivos asintomáticos (SP) y 15 pacientes con Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA) simultaneamente con 20 individuos controles sanos (CS) y 10 hombres homo y bisexuales seronegativos (SN) y 15 pacientes con Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA) simultáneamente con 20 individuos controles sanos (CS) y 10 hombres homo y bisexuales seronegativos (SN). Los fenotipos CD3, CD4, CD29 y CD45RA fueron analizados por citometría de flujo de dos colores. Encontramos depleción significativa de los linfocitos T CD4+ y de las subpoblaciones de células memoria (CD4+/CD29+) y virgen (CD45/CD45RA+) en los pacientes SP y SIDA, en comparación con los grupos CS y SN. Las respuestas proliferativas con dosis óptimas de Candida Albicans, Estreptokinasa y Toxoide Tetánico fueron exploradas en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y en poblaciones enriquecidas de células CD4+ y CD4/CD29+. En pacientes SP, la respuesta ante C. Albicans de CMSP estaba significativamente disminuída con respecto a la de CS (15.308 vs 35.951 cpm). La reducción de la proliferación frente a estreptokinasa fue evidente solamente con preparaciones enriquecidas de linfocitos Cd4+/cd29+ (3.084 vs 10.367 cpm). Una vez analizados los resultados, evidenciamos entre los pacientes SP, 7 individuos respondedores a por lo menos un antígeno y 7 no respondedores. En este último grupo, la ausencia de proliferación era independiente del número absoluto de células memoria y virgen. La respuesta frente a Toxoide Tetánico, aunque disminuida en SP, no era significativamente diferente de la CS. Nuestros resultados sugieren que la respuesta defectuosa frente a antígenos ambientales comunes, no relacionada con el número absoluto de linfocitos CD4+/CD29+, es probablemente un indicador temprano de lesión linfocitaria inducida por el VIH

Linfocitos T4-T8 y su relación con el SIDA / T4-T8 lymphocites and its relation with AIDS

Los linfocitos T4 y T8 son una de las tres variedades de linfocitos del organismo. Los T4 son los "generales" que ordenan a los "soldados" (linfocitos B) que fabriquen anticuerpos contra el virus invasor. Pero como el virus del SIDA (HIV) primero destruye a los "generales" y no queda quien ordene la defensa y el organismo queda totalmente desprotegido. Sus defensas, van bajando progresivamente por falta de renovación y cuando están son muy deficientes, invade el organismo el Pneumocystis carinni o citomegalovirus con sus manifestaciones neumónicas. Meningitis por criptococo, histoplasmosis, diseminada con compromiso pulmonar. Otra de las grandes complicaciones que origina el virus HIV es la aparición de procesos malignos, como el adenocarcinoma rectal, linfomas, sarcoma de Kaposi y carcinoma espinocelular de la lengua. Pero el final más frecuente del paciente con SIDA, es por afección pulmonar masiva, de diferente etiología.

Inmuniead y Caldida albicans: un estudio de poblaciones y subpoblaciones linfocitarias / Inmmunity and Candida albicans: a study of lymphocytari popolations and subpopulations

En este trabajo se presentan los resultados de un estudio inmunológico, realizado en 13 pacientes con síndrome de hipersensibilidad a la Candida. Los estudios micológicos confirmaron los hallazgos clínicos de candidiasis. En cada uno de los casos, se realizó cultivo, tipificación y recuente de colonias, que fluctuaron entre 9 800 y 90 000 unidades formadores de colonias de C. albicans/g de materia fecal peso húmedad. Las pruebas de hipersensibilidad cutánea fueron realizadas con 4 antígenos. Todos los pacientes mostraron positividad en la lectura precoz y negatividad en la tardía, a excepción de 4 de ellos. La inmunogluvina E fue cuantificada por ELISA y se encontraron valores por encima de lo normal en 84%de los casos. Los valores hallados fluctuaron entre 31 y 1 000 Ul/ml. La cantidad de LB fue normal en todos los casos, mientras que el de Lt fue normal en 46%y disminuido en 54%de los pacientes. En ambas determinaciones se usó el método de las rosetas. En subpoblaciones de LT se determinaron por técnica de inmunofluorescencia indirecta, con anticuerpos monoclonales. Los CD4+ (cooperadores/inductores) se encontraron disminuidos en 77%de los casos mientras que los CDB+ (citotómicos/supresores) estuvieron normales en la mayoría de ellos (84%). De acuerdo con estos resultados se puede deducir que existe una estrecha relación entre candidiasis, IgE aumentada e inmunodeficiencia fundamentalmente de la inmunidad mediada por células y en especial de las subpoblaciones CD4+. Se propone que en el momento de programar el esquema terapéutico, se incluya un tratamiento inmunomodelador, si fuera necesario, con la finalidad de lograr mayor eficacia terapéutica.

Alteraciones cuantitativas de las subpoblaciones linfocitarias en la retinosis pigmentaria / Quantitative changes in lymphocytic subpopulation in pigmentary retinosis

Se determinan los valores relativos de las células CD3+, CD4+ y CD8+ periféricas, los niveles de inmunocomplejos circulantes y las concentraciones séricas de las proteinas C3 y C4 del sistema de complemento en 27 pacientes con el objetivo de investigar la posible presencia de alteraciones inmunológicas en la retinosis pigmentaria. Se encontraron valores disminuidos de las células CD3+ y CD4+ en los pacientes, lo que se asocia con un índice CD4/CD8 bajo en relación con el grupo control. No se demostró la presencia de inmunocomplejos circulantes en ninguno de los enfermos. Las cifras séricas medias del C3 y C4 fueron inferiores a las de los controles. El descenso de las células CD4+ encargadas de inducir y cooperar en una respuesta inmune indica un defecto en los mecanismos de competencia inmunológica en la retinosis pigmentaria

Evaluación de las subpoblaciones linfocitarias CD4+ y CD8+ en adultos infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) / valuation of CD4+ and CD8+ lymphocyte subpopulation in adults infected with the human immunodeficiency virus

Se presentan los resultados de la evaluación de las subpoblaciones linfocitarias CD4+ y CD8+ en 127 adultos cubanos, infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) y acogidos a tratamiento sanatorial. En comparación con el grupo control, se encontró una disminución significativa de las células CD4 en los infectados con VIH (32,2+13.3 vs. 48,2 + 10,4 %: p<0,01), un incremento significativo en las células CD8+ (39,3 + 12,4 % vs. 26,5 + 10.2 %, p<0,01) y una disminución de la relación CD4/CD8 (0,9 + 0.6 vs. 2,0 + 0,7: p<0,01). Cuando los seropositivos al VIH se agruparon según su clasificación clínica después del ingreso en el sanatorio, tanto en los asintomáticos como en los casos con linfoadenopatía persistente generalizada y en los que presentaron otras complicaciones incluyendo el SIDA, se detectaron individuos con disminución de la relación CD4/CD8 desde su ingreso. Sin embargo, en los asintomáticos esta alteración se presentó sólo en el 28 % de los casos, mientras que en los pacientes sintomáticos el 37 % tenía esta alteración. El nivel de linfocitos T CD4+ no permitió diferenciar a los individuos clinicamente más afectados del resto de los infectados con VIH

Analysis of lymphocyte sub-populations of patients with systemic lupus erythematosus in different clinical phases

The behaviour of lymphocytes found in peripheral blood was studied in 59 SLE patients grouped according to therapeutic regimen (cortisone (CE), CE and antimalarial drugs (CE + AM), and no therapy). Monoclonal antibodies OKT3, OKT4, OKT8, anti-class II HLA, sheep erytrocyte rosette (ER), and rosette formed by zymosan particles treated with complement (ZC) were used to identify lymphocytes from SLE patients and 94 healthy subjects. The profile of the lymphocyte subpopulations of treated or untreated patients with active and inactive SLE showed reduced values, as compared to those of the healthy population; significant variation was observed in patients with active SLE treated with CE, compared to patients who received CE + AM. We noticed a good correlation index between the lymphocytes values for OKT3 and ER, as well as between ZC and anti-class HLA. A direct correlation between the profile subpopulations and different clincial manifestations was not evident, which limits the suitability of these tests in the routine diagnostic practice

Peripheral lymphocyte subpopulations in selective IgA deficiency

Estudaram-se as subpopulaçöes de linfócitos no sangue periférico de 12 crianças e adolescentes portadores de deficiência seletiva de IgA. Do ponto de vista clínico, estes pacientes constituíam um grupo mais ou menos homogêno, em que as manifestaçöes predominantes eram as infecçöes recorrentes e as doenças alérgicas do trato respiratório. Todos apresentavam níveis normais de subclasses de IgG no soro. O grupo controle constou de 20 crianças e adolescentes, que iam ser submetidas a cirurgias eletivas de pequeno porte. No que se refere aos linfócitos B, observou-se expressäo das três principais classes de imunoglobulinas (G, M e A) na membrana dos linfócitos de todos os pacientes estudados, embora os valores percentuais de células com IgM e IgA de superfície tenham se mostrado significativamente mais baixos que os dos controles. Com relaçäo aos linfócitos T, os valores percentuais de CD3 e CD4 (linfócitos T totais e T auxiliadores respectivamente) foram mais elevados nos pacientes que nos controles. Os valores de células CD8+ (supressoras/citotóxicas) assim como a relaçäo CD4/CC8 foram equivalentes nos dois grupos analisados. Estes dados falam a favor de que os linfócitos B destes pacientes alcançaram seu estádio final de maturaçäo, com expressäo de IgA na membrana. Pode-se concluir que o bloqueio que leva à ausência desta classe de imuneglobulina no sangue e nas secreçöes destes doentes, ocorra na fase final de secreçäo da IgA pela célula. Os achados quanto às subpopulaçöes de células T, näo podem ser implicados como causa da falta de produçäo de IgA

Kinetics of lymphocyte subpopulations in dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome.

A kinetic study of lymphocyte subpopulations was performed in 61 dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome (DHF/DSS) patients aged 8 months to 12 years and in 59 age-matched normal controls. There were 36 patients in grade 2 and 25 patients in grade 3 of the disease severity. The studies were performed on febrile stage, the day of subsidence of fever or shock stage, 3 subsequent days after subsidence of fever or shock, and once on the recovery stage (approximately 14-18 days after subsidence of fever or shock). The study revealed that the absolute total lymphocytes, CD3+, CD4+, CD8+ and HNK-1+ cells were decreased on febrile stage and their lowest values were noted on the first day of subsidence of fever or shock, while B1+ cells were in the normal range. Thereafter, all lymphocyte subpopulations were increased. The total lymphocytes, B1+ and CD8+ cells were rapidly increased and were above normal value on day 2 after subsidence of fever or shock (early convalescence), then gradually declined to the normal range. In contrast, CD3+, CD4+ and HNK-1+ cells were increased gradually and reached their normal values on day 2 after subsidence of fever or shock. The T4:T8 ratio began to reverse on the day of subsidence of fever or shock, reached its peak on day 2 after shock and returned to normal ratio rapidly thereafter. Thus, the absolute lymphopenia on the day of shock was due to the decrement or T cells (both CD4+ and CD8+ cells) and HNK-1+ cells.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)

Evaluación inmunologica de pacientes con virus de inmunodeficiencia humana (VIH)

Se presenta la evaluación inmunológica que efectuamos en 69 pacientes con infección confirmada por el Virus de la Inmunodeficiencia Adquirida (HIV), de los cuales 61 (88%) pertenecían al sexo masculino y 8 (12%) al sexo femenino. La mayoría de los casos se encontraba entre los 21 y 40 años (47 pacientes, 68%). La causa más importante de la trasmisión fué la homosexual (46 pacientes, 66,5%), seguida por la heterosexual (12 pacientes, 17%) y las transfusiones de sangre (10 pacientes, 15%). La homosexualidad fue entre los hombres la causa principal de contagio (77%); en las mujeres, la transfusión de sangre infectada (62%). Se clasificó a los pacientes según el CDC de Atlanta en las siguientes catagorías: Grupo I, ningún caso; Grupo II, 24 pacientes (35%); Grupo III, 26 casos (38%); y Grupo IV o con SIDA-AIDS, 19 pacientes (27%), de los cuales 9(47%) han fallecido. Las pruebas cutáneas de inmunidad celular fueron negativas en 5 de los 24 pacientes del Grupo II, en 1 de los 26 pacientes del Grupo III, y en 13 de 19 pacientes del Grupo IV. La relación T4/T8 se encontró invertida en 9 de los 24 pacientes del Grupo II, en 20 de los 26 del Grupo III, en 20 de los 26 del Grupo III y en los 19 del Grupo IV. Las Inmunoglobulinas estuvieron aumentadas en el 69% de todos Grupo IV (94%). El recuento de linfocitos fué bajo en los pacientes del Grupo IV. Los otros parámetros (C'3, C'4, CH50, Crioglobulinas) aparecieron alterados en los pacientes del Grupo IV. La Fagocitosis, N.B.T. y la Quemotaxis estuvieron escasamente alteradas

Estudo dos linfócitos circulantes por anticorpos monoclonais na miastenia grave / Circulating lymphocytes by monoclonal antibodies in myasthenia gravis

Os autores avaliam os linfócitos T (CD3, CD4, CD8, CD4/8) por anticorpos monoclonais e rosácea em 20 pacientes e linfócitos B por Fab' por imunofluorescência em 9 pacientes com miastenia grave. Observam elevaçäo significante na populaçäo de linfócito B e reduçäo nos linfócitos T totais CD3 + por rosáceas. Näo foram observadas modificaçöes nas subpopulaçöes celulares com timectomia e corticosteróides

Lymphocyte subpopulations during acute and convalescence phases of malaria.

Lymphocytes of normal healthy persons were separated from blood by Ficoll-Hypaque gradient centrifugation and iron-magnet application. peripheral blood lymphocytes (PBL) were stained by various dye-labeled monoclonal antibodies. Cells positive for specific surface markers were enumerated by a fluorescence activated cell sorter (FACS) and fluorescence microscope (FM). The results revealed that the percentages of cells positive with one monoclonal antibody counted by these two techniques were similar while the percentages of cells with double staining were higher when counted by FACS than by FM. Lymphocyte subpopulations of 18 patients infected with Plasmodium falciparum during acute and convalescence period were studied. Lymphocytopenia occurred during the acute infection while total white blood cell counts were normal. PBL of the patients were stained with OKT3, OKT4, OKT8, Leu-11 and a combination of Leu-7, Leu-1 monoclonal antibodies. The absolute numbers of all lymphocyte subpopulations were decreased during the acute infection while T8 positive cells were decreased in both percentage and absolute number. Thus T4:T8 ratio (1.7:1) became higher than normal (1.3:1) at this period. During convalescence phase, absolute numbers and percentages of Leu-7+, Leu-1+ and perhaps Leu-7+, Leu-11- cells which had low NK cell activity were significantly higher than during acute illness. The finding might explain why the NK cell activity was low during the convalescence period.

Alteraciones leucocitarias en ratones portadores de sarcoma 180 / Leukocyte changes in mice bearing sarcoma 180

Se determinaron los valores avsolutos de la sdistintas poblaciones leucocitarias periféricas en ratones BALB/c normales y esplenectomizados (XB), desafiados con Sarcoma 180 sólido (S180s) y ascítico (S180a), inoculados por vías subcutánea e intraperitoneal, respectivamente. Las evaluaciones fueron realizadas al 8-, 15- y 25- día de crecimiento tumoral. Se observó: 1) leucocitosis en todos los grupos; 2) disminución del número de linfocitos al 15- y 25- día y disminución de monocitos al día 25-, en el grupo con S180s; 3) en el grupo XB, un incremento de todas las poblaciones leucocitarias, máximo entre el 8- y 15- día, valores que tendieron a normalizarse en el día 25-, en el grupo XB inoculado con S18s, neutrofilia, linfocitosis y monocitosis hasta el día 25-; 4) los valores máximos de neutrofilia correpsondieron al grupo S180a con 1905% de incremento en el día 15-, mientras que las cifras mayores de linfocitos y monocitos fueron observadas en el brupo XB inoculado con S180s en el día 15- con incrementos de 387% y 589% respectivamente, y 5) el aumento de neutrófilos fue constante en todos los grupos, observándose además altereaciones particulares en cada grupo